為定性測試紫外可見（ＵＶ－ＶＩＳ）分光光度計的線性度，以水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)定法為基礎(chǔ)，用一 臺紫外可見分光光度計在特定波長處測得一種食物染料的吸光度，再用基本的數(shù)學(xué)方法計算出 各個測試點的體積分?jǐn)?shù)，進(jìn)而獲得體積分?jǐn)?shù)和吸光度的線性關(guān)系。實驗表明，該方法可以方便 地測試出儀器線性度，計算方法正確且簡單易懂。

紫外可見分光光度計是一種很重要的分析儀器，在使用一臺新的紫外可見分光光度計儀器前，一般 需要先對儀器的線性度進(jìn)行測試。但大多數(shù)使用者只是在某一試樣的某一濃度附近，用濃度的倍數(shù)變化 來測出這一段的線性度。這只能反映儀器在小范圍內(nèi)的使用情況，并不能說明儀器的線性度是否符合出 廠指標(biāo)，也不能反映儀器的線性范圍。因此，在儀器使用前對其線性度的測試有著重要的意義［１］。

１ 紫外可見分光光度計工作原理

比爾在研究了各種無機(jī)鹽的水溶液對紅光的吸收情況后指出，光的吸收和光所遇到的吸光物質(zhì)的數(shù) 量有關(guān)，如果吸光物質(zhì)溶于不吸光的溶劑中，則吸光度和吸光物質(zhì)的濃度成正比。即當(dāng)單色光通過液層式中：Ａ 為吸光度；Ｉ０ 為入射光強度；Ｉ為透射光強度；Ｃ 為溶液的濃度；Ｋ１ 為比例常數(shù)。 紫外可見分光光度計主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、檢測系統(tǒng)組成。紫外可見分光光度計 的技術(shù)指標(biāo)主要有 １１個［２－３］，即波長準(zhǔn)確度、波長重復(fù)性、光度準(zhǔn)確度、光度重復(fù)性、雜散光、光譜帶寬、 基線平直度、穩(wěn)定性、光度噪聲、線性度、線性動態(tài)范圍。除了線性動態(tài)范圍，其他的技術(shù)指標(biāo)一般都在 儀器指標(biāo)中寫出明確的測量方法及要求。紫外可見分光光度計的線性度在定量分析工作中有著極其重 要的意義，文獻(xiàn)［４］指出，如果儀器的線性度很差，就不可能得到好的定量分析結(jié)果。 ２ 測試方法 分光光度計線性度測試的方法很多，常用的方法大致有［４］： （１）溶液稀釋法：將重鉻酸鉀稀釋到不同濃度，測量不同波長處的吸光度（一般需測８５個吸光度值）， 然后根據(jù)此數(shù)據(jù)作曲線，判斷線性度。 （２）中性濾波片法：一般以３塊中性濾波片疊加，比較測定值與計算值之差來判斷線性度。 （３）百分法：使被測試樣濃度成倍增加，測其吸光度并作曲線，判斷實驗值偏離比爾定律直線部分的 程度。 （４）改變池厚法：用不同厚度的樣品池來測量重鉻酸鉀的吸光度，以此觀察光度計的線性度。 （５）旋轉(zhuǎn)扇形 板 法：將不同透射率的扇形板置于樣品光束中旋轉(zhuǎn)，測出各點透射率并與真值進(jìn)行 比較。 （６）光疊加法：利用雙孔規(guī)來分段測量，然后用曲線判斷線性度。 李昌厚教授［４］曾通過實踐提出 Ｌ／Ｌ－ＣＭ 法（即雙對數(shù)測量法），但是該方法需配制級數(shù)遞增的不同濃 度試樣，存在配樣誤差，所以本文提出了以體積分?jǐn)?shù)測試光度計的線性度的方法，通過配制不同體積分?jǐn)?shù) 的溶液，來測量其線性度。表１是幾種線性度測試方法的比較。

３ 實 驗 本文利用水質(zhì)儀標(biāo)定法來配制標(biāo)準(zhǔn)液，通過定性配制溶液，測得溶液在特定波長的吸光度，從而得到 標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過與比爾定律的直線部分對比，得到儀器的線性度。實驗所用儀器及試劑有綠色食品染劑、移液器（１ｍＬ和５ｍＬ）、石英比色皿和攪拌機(jī)。 實驗步驟如下： （１）由于食品染劑本身比較濃，首先稀釋食品染料。因此，在５４ｍＬ蒸餾水中加入６ｍＬ食品染劑，得到６０ｍＬ的測試母液，設(shè)其體積分?jǐn)?shù)為Ｃ０。 （２）在５００ｍＬ的燒杯中加入１５０ｍＬ（設(shè)為Ｖ１）的蒸餾水，作為測試液。 （３）用移液槍將１ｍＬ（設(shè)為 體 積Ｖ０）的母 液 加 入 到５００ ｍＬ 的燒 杯 中，并 攪 拌 均 勻，得 到 該 點 的 測 試液。 圖１ ２６０ｎｍ 處食品染劑的吸光度 用移液槍將測試液加入到石英比色皿，放 入 分 光 光 度計 的 樣 品 槽，以 蒸 餾 水 作 為 參 照，測 量 在 波 長 ２６０ｎｍ、 ３４０ｎｍ和５９０ｎｍ 處的吸光度，并記錄數(shù)據(jù)。 （５）將比色皿內(nèi)的測試溶液倒回５００ｍＬ的燒杯中，重復(fù) 步驟（３）和（４），直至測到儀器顯示超出測量范圍。

４ 結(jié) 論 本文提出了一種無需計算溶液具體濃度，直接利用溶液體積分?jǐn)?shù)比例關(guān)系就可測出儀器的線性度的 方法。在需要計算溶液濃度時，僅需再知道母液的濃度即可計算各個測試點的具體濃度，并且兩次 測量的間距也是可以控制的，從而可以減少測試點，不用像溶液稀釋法那樣必須測８５個點。 通過實驗證實，該方法可以定性地測出儀器的線性度，測試溶液的體積分?jǐn)?shù)可以由低到高一直增加， 直到光度計超出儀器的測試范圍。該方法能很好地測出儀器的線性范圍，獲得更好的線性度，使儀器的 使用者得到更的實驗結(jié)果。本方法也可在儀器的生產(chǎn)過程中測試其線性度，從而降低產(chǎn)品不良率。