目的 評價便攜式分光光度計現(xiàn)場檢測飲用水中氰化的效果。 方法 將氰化標(biāo)準(zhǔn)溶液配制成低濃度（0.01 mg/L）、中濃度 （0.05 mg/L）、高濃度 （0.10 mg/L）3 種溶液 ，用便攜式分光光度計測定 ，評價不同反應(yīng)溫度 （15℃、20℃、25℃、30℃、35℃）及時間（15 min、20 min、30 min、40 min、50 min）的測定效果 ，考察方法的線性范圍 、精密度及準(zhǔn)確度 。結(jié)果便攜式分光光度計適反應(yīng)溫度為 25℃，適反應(yīng)時間為 20～30 min；線性范圍為 0.002～0.15 mg/L；低、中、高濃度的氰化標(biāo)準(zhǔn)溶液測定相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為 11.8%、3.82%、1.61%；與國標(biāo)方法比對，相對偏差<10%；加標(biāo)回收率滿意。 結(jié)論 便攜式分光光度計準(zhǔn)確、簡便、快速，適用于飲用水中氰化的現(xiàn)場檢測。

氰化是含有氰基 （-CN） 的一類化合物的總稱，屬于劇毒物，是危險化學(xué)品之一，能引起飲用水急性中毒[1]。 目前測定生活飲用水中的氰化主要采用異煙酸-吡唑酮分光光度法和異煙酸-巴比妥

酸分光光度法[2]，這些方法均存在著操作步驟繁瑣、分析速度慢等缺點，不能滿足現(xiàn)場應(yīng)急檢測的需要；而試劑盒法[3]、紙片法[4]等方法則存在著測定值不的問題。 便攜式分光光度計快速檢測是基于異煙酸-吡唑酮分光光度法的原理，在中性條件下，樣品中的氰物與氯胺 T ，再與異煙酸作用，經(jīng)水解后生成戊烯二醛，后與吡唑酮縮合生成藍(lán)色染料，其色度與氰化的含量成正比[5]。 該方法通過內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，可實現(xiàn)濃度直讀，快速、簡便，能夠滿足水質(zhì)現(xiàn)場檢測的需要。

1  材料與方法

1.1  材料

1.1.1  儀器  美國哈希公司 DR2800 便攜式分光光度計，配置有 2.54 cm 方形比色皿和試劑粉包。

1.1.2 試劑  氰化標(biāo)準(zhǔn)溶液購于國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心，編號為 GBW（E）080115，標(biāo)準(zhǔn)值 50.0 μg/ml。 使用前用純水稀釋成濃度為 1.00 mg/L 的標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。

1.2  方法

1.2.1 儀器操作  打開分光光度計， 儀器自檢完畢后，選擇測試程序“160 氰化”；在比色皿中加入 10 ml純水， 置于樣品池中， 調(diào)零， 儀器顯示 0.000 mg/L CN-；在比色皿中加入 10ml 樣品，再加入 1 包氰化 3 號試劑粉包，蓋上蓋子，搖晃比色皿 30s 后，靜置 30s；加入 1 包氰化 4 號試劑粉包，蓋上蓋子，搖晃比色皿 10s， 立即加入 1 包氰化 5 號試劑粉包，蓋上蓋子，劇烈搖晃比色皿。 如果樣品中含有氰化， 溶液將從粉紅色變成藍(lán)色。 將比色皿置于樣品池中讀數(shù)，結(jié)果為以 mg/L CN-為單位[6]。

1.2.2 反應(yīng)溫度與時間的選擇  分別配制低濃度（0.01 mg/L）、中濃度（0.05 mg/L）、高濃度（0.10 mg/L）氰化溶液， 在不同溫度 （15℃、20℃、25℃、30℃、35℃）、 不同反應(yīng)時間 （15 min、20 min、30 min、40 min、50 min）下，測定溶液中氰化的濃度 ，以考察溫度和時間對測定結(jié)果的影響。

1.2.3 檢出限測定 根據(jù) 《GB/T5750.3-2006 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》的要求[2]，分光光度法中低檢測質(zhì)量按凈吸光度 0.02 所對應(yīng)的質(zhì)量濃度。 將氰化標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋并檢測， 直到其凈吸光度達(dá)到0.02，所得濃度即為方法的檢出限。

1.2.4線性范圍測定用純水將氰化標(biāo)準(zhǔn)溶液配制成 0.002 mg/L、0.005 mg/L、0.01 mg/L、0.05 mg/L、0.10 mg/L 和 0.15 mg/L 溶液。 測定其吸光度，擬合回歸方程，計算相關(guān)系數(shù)。

1.2.5精密度測定分別對低、中、高濃度（0.01 mg/L，0.05 mg/L，0.10 mg/L） 氰化溶液連續(xù)測定 6 次，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

1.2.6 準(zhǔn)確度測定 （1）分別用便攜式分光光度法與國家標(biāo)準(zhǔn)中異煙酸-巴比妥酸分光光度法對低、中、高3 個濃度的氰化溶液進(jìn)行測定，計算測定值的相對偏差。 （2）測定低、中、高濃度 3 個濃度氰化溶液，計算其回收率。

2 結(jié) 果

2.1 反應(yīng)溫度與時間  不同反應(yīng)溫度 （15℃、20℃、25℃、30℃、35℃）、 不同反應(yīng)時間 （15 min、20 min、30 min、40 min、50 min）對不同濃度氰化測定的影響見表 1、表 2 和表 3。 當(dāng)反應(yīng)溫度在 20～30℃之間時，3 個濃度的氰化溶液檢測值均能達(dá)到預(yù)期值（與標(biāo)準(zhǔn)溶液的偏差小于 10%），反應(yīng)溫度低于15℃或者高于 35℃時，檢測結(jié)果偏低。檢測結(jié)果隨著反應(yīng)時間的增加而增大，并且反應(yīng)溫度越低，需要的反應(yīng)時間越長。 當(dāng)反應(yīng)溫度為 25℃時，反應(yīng)時間在20～30min 就能達(dá)到大值， 因此適反應(yīng)溫度為

25℃，適反應(yīng)時間為 20～30 min。

2.2  檢出限測定當(dāng)氰化溶液濃度為0.002 mg/L時，吸光度值分別為 0.019、0.021、0.023、0.025、0.022和 0.024，平均值為 0.022，符合國家標(biāo)準(zhǔn)要求。 確定0.002 mg/L 氰化為便攜式分光光度法的低檢測濃度。

2.3    線性范圍確定  在氰化濃度 0.002～0.15 mg/L范圍內(nèi)線性良好，線性回歸方程為：y=6.372x+0.006，相關(guān)系數(shù)為 0.9998。

2.4    精密度測定  低、中、高濃度的氰化溶液的 6次測定結(jié)果見表 4。 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為 11.8%、3.82%和 1.61%，滿足國家標(biāo)準(zhǔn)的要求。

2.5    準(zhǔn)確度測定

2.5.1 方法比對實驗結(jié)果 本方法與國標(biāo)方法的測定值比對結(jié)果見表 5，對于不同濃度的樣品，本方法與國標(biāo)方法測定值的相對偏差均在 10％以內(nèi)，說明本方法的準(zhǔn)確度接近國標(biāo)方法。

3  討  論           

DR2800 便攜式分光光度計可在 5s 內(nèi)顯示 10次測量的平均結(jié)果，并存儲 500 組實驗數(shù)據(jù)[7]，配備有鋰電池及試劑粉包， 可在野外現(xiàn)場使用。 由于檢測過程可受到環(huán)境溫度、樣品 pH 值、氰化濃度及干擾物的影響，因此要特別注意以下幾點：（1）當(dāng)環(huán)境溫度在 25℃左右時，可在室溫下反應(yīng) 20～30 min；若溫度低于 15℃或者高于 35℃時，需要使用水浴來期發(fā)現(xiàn)胎兒發(fā)育異常， 呈小頭畸形。 先天性遺傳缺陷導(dǎo)致的胎兒發(fā)育異常， 其羊水的遺傳性檢測常見染色體片段丟失及拷貝數(shù)異常， 而本病例的羊水遺

傳性學(xué)檢測未見染色體片段丟失及拷貝數(shù)異常，結(jié)合病例已生育過 1 個健康男孩的孕產(chǎn)史， 可排除部分遺傳性因素， 進(jìn)一步提示其胎兒小頭癥可能與寨卡病毒感染有關(guān)。實驗室檢測顯示，該病例和家屬的血液、尿液和精液樣本的寨卡病毒核酸檢測均為陰性， 但該病例寨卡病毒 IgG 呈陽性、IgM 陰性，提示該病例有寨卡

病毒感染史。       

根據(jù)國家衛(wèi)生和計劃生育委員會印發(fā)的 《寨卡病毒病診療方案》（2016 年第二版） 的病例定義，該病例尚不滿足確診病例標(biāo)準(zhǔn)。 依據(jù)流行病學(xué)史、癥狀、既往孕產(chǎn)史、影像學(xué)和實驗室檢測結(jié)果的綜合判斷， 認(rèn)為這是 1 例寨卡病毒病并發(fā)胎兒小頭畸形的

保持適反應(yīng)溫度。

（2）樣品的 pH 值要接近中性，

對于用氫氧化鈉保存的樣品，測定前需用鹽酸溶液將其 pH 值調(diào)節(jié)至 7。（3）樣品中氰化濃度高于 0.15 mg/ L 時，可能造成檢測結(jié)果偏低，需稀釋后測定。采用 DR2800 便攜式分光光度計對飲用水中的氰化進(jìn)行現(xiàn)場檢測，反應(yīng)溫度是 25℃，適反應(yīng)時間為 20～30 min。 這一條件下， 可準(zhǔn)確測定0.002～0.15 mg/L 濃度范圍內(nèi)的樣品溶液，對低、中、高濃度氰化溶液的檢測，與國標(biāo)方法比對，測定值的相對偏差均在 10％以內(nèi)，加標(biāo)回收率滿意，具有較高的精密度和準(zhǔn)確度， 適用于突發(fā)性氰化污染事故的現(xiàn)場快速定量檢測。