牛樟芝（Antrodia camphorate T.T.Chang & W.N. Chou）是中國臺灣一種罕見的藥用真菌，屬擔(dān)子菌門菌 蔁綱無褶菌目多孔菌科薄孔菌屬，又名樟芝、樟菇、 牛樟菇、紅樟芝、血靈芝，牛樟芝生長在中國臺灣*的 牛樟樹的內(nèi)部心材上。 牛樟樹僅在中國臺灣生長，主要 分布在海拔 450～2 000 m 的闊葉林中，生長緩慢。 近年來，人工培養(yǎng)牛樟芝逐漸興起，主要有椴木栽 培、液體培養(yǎng)、固體培養(yǎng)三種方法［1］。 牛樟芝活性成 分多種，其中已被鑒定的超過 200 種，主要有三萜、 多糖及糖蛋白、類固醇、木脂素、苯醌衍生物、馬來 酸和琥珀酸衍生物等［2］。 現(xiàn)代研究表明：牛樟芝具 有抗腫瘤、抗炎、抗氧化、保肝、預(yù)防肝纖維化、神經(jīng) 保護、舒張血管、抗高血壓等作用［3］。 其中，三萜是 牛樟芝的主要活性成分之一，也是牛樟芝苦味的主 要來源，具有抗腫瘤、保肝、降血壓等作用［4］。 本研 究通過比色法測定人工培育牛樟芝子實體的總?cè)?萜含量，為牛樟芝子實體的開發(fā)利用提供一定的實 驗依據(jù)。 1 儀器與材料 1.1 儀器 UV-1800 紫外可見分光光度計；1.2 材料 熊果酸（純度≥98%，；香蘭素、高氯酸、冰 乙酸、甲醇均為分析純

2 方法與結(jié)果 2.1 牛樟芝醇提物的制備 牛樟芝子實體切片， 60℃干燥后粉碎，過 40 目篩，60 ℃干燥至恒重。 取 牛樟芝粉末 20 g， 加入 400 mL 95%乙醇回流提取3 次，過濾，濾液濃縮干燥即得牛樟芝的醇提物。 牛樟 芝醇提物平均得率為（35.47±0.15）%，RSD 為0.4%。 2.2 供試品溶液的制備 精密稱取牛樟芝醇提物 5 mg 加甲醇定容至 10 mL，配制成 0.5 mg／mL 的供 試品溶液。 2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密稱取熊果酸 2.04 mg， 加甲醇定容至 10 mL，得 0.204 mg／mL 的熊果酸對 照品溶液。 精密量取 0.1、0.2、0.3、0.4、0.6、0.8 mL 于試管中，水浴揮干，加 5%香草醛-冰乙酸溶液 0.2 mL、高氯酸 0.8 mL，60℃水浴 15 min，再冰水浴 5 min，加 5 mL 冰乙酸，搖勻后放置至室溫，于 510 nm 處測定吸光度。 以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程：Y＝4.16×10-2X－ 7.85×10-2，r 值＝0.999 1。 熊果酸在 3.4～27.2 μg／ mL 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.4 方法學(xué)考察 2.4.1 精密度 取濃度為 0.2 mg／mL 的對照品溶 液，按 2.3 下的方法進行測定，平行 6 份，得 RSD 值 為 2.34%，表明儀器精密度良好。 2.4.2 重復(fù)性 取供試品 6 份，配制成 0.5 mg／mL 的待測溶液；取 600 μL 的供試品溶液，按 2.3 下的方法測定吸光度， 計算三萜含量，RSD 值為 3.3%， 表明重復(fù)性良好。 2.4.3 穩(wěn)定性 精密量取樣品，按 2.3 下的方法測 定吸光度，每 15 min 測定 1 次，在 2 h 內(nèi)顯色穩(wěn)定， RSD 值為 1.77%，表明待測樣品溶液在 2 h 內(nèi)穩(wěn)定。 2.4.4 加樣回收率實驗 取已知含量的供試品 6份，按照 1∶1 的比例加入一定量的對照品混勻，精密 吸取混勻后的供試品溶液， 按 2.3 下的方法測定吸 光度，計算加樣回收率和 RSD 值，結(jié)果見表 1。 計算 得平均加樣回收率為 102.0%，RSD 為 1.96%， 加樣 回收率范圍 99.40%～104.63%，表明該方法具有良 好的加樣回收率。

2.5 牛樟芝醇提物中總?cè)频暮繙y定 取牛樟 芝醇提物粉末 5 mg，定容至 10 mL，即得 0.5 mg／mL 的供試品溶液；取 600 μL 樣品溶液，按 2.3 下的操 作方法進行測定，計算醇提物中總?cè)频暮?，平?3 份。 測得牛樟芝醇提物中總?cè)坪繛椋?9.40± 0.97）%，相當(dāng)于干品牛樟芝總?cè)坪繛?10.43%。 3 討 論 牛樟芝作為傳統(tǒng)藥物在中國臺灣民間用以解食物 中毒、解酒、保肝、治療腹瀉及皮膚瘙癢等癥［5］。 近 年來由于牛樟芝的人工培養(yǎng)技術(shù)日漸成熟， 迫切 需要建立牛樟芝的質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)，以為其開發(fā)利用 提供理論依據(jù)［6］。 三萜是牛樟芝子實體的重要活性成分之一，可 作為評價其質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。 本文以熊果酸作 為對照品，采用比色法對牛樟芝總?cè)坪窟M行了 測定，結(jié)果表明牛樟芝中總?cè)坪扛哌_ 10.43%。該方法測定三萜重復(fù)性好，可作為評價牛樟芝子實 體質(zhì)量的方法之一。