紫外可見分光光度計的使用要點

 紫外可見分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。測量范圍一般包括波長范圍為400~800 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200～400 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。那么使用分光光度計過程中要注意哪些問題呢?

　　1.堅持標(biāo)準(zhǔn)溶液現(xiàn)用現(xiàn)配，不使用過期標(biāo)準(zhǔn)液。使用儀器之前，一般要校正儀器，看看空白時透光率是否是100%。

　　2.比色皿應(yīng)該保持清潔，干燥。如有污物，可用稀鹽酸清洗后，再用1：1的酒精與乙米清洗涼干。禁止用硬物碰或擦透明表面?；蛘呓ㄗh使用10%的鹽酸溶液浸泡，然后用無水乙醇沖洗2~3次。比色皿具有方向性，使用時要注意，仔細觀察比色皿上方應(yīng)該有一個箭頭標(biāo)志的，代表入射光方向。注入和倒出溶液時，應(yīng)該選擇非透光面。使用配對的比色皿。

　　3.防止儀器振動，影響光學(xué)系統(tǒng)。

　　4.在開機狀態(tài)，不測量時，應(yīng)該打開樣品池門，否則，影響光電傳感器壽命。

　　5.樣品集中測量，避免開機次數(shù)，可延長光源壽命。

　　6.儀器工作穩(wěn)定性差，漂移大時，應(yīng)該考慮更換光源或光電元件。

　　7.一般分光儀主要有光源部分、光路部分、檢測器三的部分，光路有的情況是穩(wěn)壓電源問題，鎢燈問題及鎢燈位置與光路不一致等問題。光路部分主要有比色皿不干凈，燈光與比色皿位置不合適(在正常情況下，比色皿位置放一張白紙，可以清楚看到光斑形狀呈顯矩形，屬于正常情況。對于檢測器大多數(shù)是正常的，但是光敏管或者光電管有時侯也會出現(xiàn)問題。

　　8.若峰出現(xiàn)很多“毛刺”，可能是掃描速度過快，濃度過高或者狹縫過小;

　　9.紫外分光光度計用來測紫外光時，石英皿用來調(diào)零時不穩(wěn)定，是由那些原因?首先確定是否用成玻璃比色皿，判斷方法在紫外區(qū)任一波長下用空氣調(diào)零測比色皿的吸光度如果超過1ABS則比色皿用錯。再次用空氣調(diào)零看零點是否穩(wěn)定，如不穩(wěn)則是儀器問題，如空氣穩(wěn)定而放入石英皿后不穩(wěn)定，則檢查是否空白溶液吸光度太高，是否空白溶液藥品過期，或者空白溶液透明范圍不適合此波長測量比如甲醇在210NM以下吸光度很大無法調(diào)零。

　　10.儀器狹縫寬度的選擇狹縫的寬度會直接影響到測定的靈敏度和校準(zhǔn)曲線的線性范圍。狹縫寬度過大時，入射光的單色光降低，校準(zhǔn)曲線偏離比耳定律，靈敏度降低;狹縫寬度過窄時，光強變?nèi)酰瑒荼匾岣邇x器的增益，隨之而來的是儀器噪聲增大，于測量不利。選擇狹縫寬度的方法是：測量吸光度隨狹縫寬度的變化。狹縫的寬度在一個范圍內(nèi)，吸光度是不變的，當(dāng)狹縫寬度大到某一程度時，吸光度開始減小。因此，在不減小吸光度時的zui大狹縫寬度，即是所欲選取的合適的狹縫寬度。

　　11.紫外測量吸光度值不準(zhǔn)

　　(1).儀器調(diào)零后跳動大的話那可能是儀器有問題。

　　(2).調(diào)零穩(wěn)定的話，看樣品濃度是否過高，控制在0-1個吸光度之間。

　　(3).濃度合適的話，看是否比色皿沒擦干凈，一般可用蒸餾水沖洗一下，擦干后用鏡頭紙擦干凈。

　　(4).檢查樣品是否穩(wěn)定，如果零點不變而放上樣品變化，那么是樣品有變化，檢查樣品是否有問題。

　　12.關(guān)于儀器維護：

　　(1).儀器工作電源一般為220V，允許10%的電壓波動。

　　(2).為了延長光源使用壽命，在不使時不要開光源燈。

　　(3).單色器是儀器的核心部分，裝在密封盒內(nèi)不能拆開，為防止色散元件受潮發(fā)霉，必須經(jīng)常更換蛋色器盒干燥劑。

　　(4).必須正確使用吸收池，保護吸收池光學(xué)面。

　　(5).光電轉(zhuǎn)換元件不能長時間暴光，應(yīng)避免強光照射或受潮積塵。