UV1901PC紫外分光光度計(jì)的用法及使用過程

紫外分光光度計(jì)是根據(jù)樣品的濃度和吸光度是成正比關(guān)系的，濃度越大，吸收值越高，也就是瑯伯-比爾定律的原理研發(fā)的測(cè)試物質(zhì)含量以及定性的實(shí)驗(yàn)室常用儀器。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、計(jì)量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個(gè)方面，用來進(jìn)行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定、反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究等。

所以紫外分光光度計(jì)用的zui多的還是定量分析，定量分析的種類有很多，這里介紹常用的幾種定量分析方法：

1、法：法是紫外可見分光光度計(jì)諸多分析方法中使用zui多的一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎(chǔ)的分析方法，某一物質(zhì)在一定波長(zhǎng)下ε值是一個(gè)常數(shù)，石英比色皿的光程是已知的，也是一個(gè)常數(shù)。因此，可用紫外可見分光光度計(jì)在λmax波長(zhǎng)處，測(cè)定樣品溶液的吸光度值A。然后，根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb，則可求出該樣品溶液的含量或濃度。

2、標(biāo)準(zhǔn)法：在選定的波長(zhǎng)處，在相同的測(cè)試條件下，分別測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液C標(biāo)和被測(cè)試樣品溶液C樣的吸光度A標(biāo)和A樣。然后，按下式求得樣品溶液的濃度或含量。

C樣=A樣/A標(biāo)×C標(biāo)

3、標(biāo)準(zhǔn)曲線法

紫外可見分光光度計(jì)zui常用的定量分析方法是標(biāo)準(zhǔn)曲線法。即先用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一定濃度的溶液，再將該溶液配制成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在一定波長(zhǎng)下，測(cè)試每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，以吸光度值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)得濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。zui后，將樣品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制程序測(cè)得吸光度值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品溶液對(duì)應(yīng)的濃度或含量。

4、 其它分析方法

除上述幾個(gè)分析方法外經(jīng)常使用的分析方法外，還有比吸收系數(shù)法、zui小二乘法、解聯(lián)立方程法和示差分光光度法。

(2) 定性分析

如果未知物的紫外吸收光譜的zui大吸收峰波長(zhǎng)λmax、zui小吸收峰波長(zhǎng)λmin、zui大摩爾吸光系數(shù)εmax，以及吸收峰的數(shù)目、位置、拐點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)光譜數(shù)據(jù)*一致，就可以認(rèn)為是同一種化合物。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質(zhì)。

定量分析和定性分析是分光光度計(jì)的兩大主要功能，特別是定量分析。其它的分析都應(yīng)該是從這兩大種功能中發(fā)展出來的。

儀器的使用情況說明：

先將UV1901PC紫外分光光度計(jì)開機(jī)自檢后

UV1901PC紫外分光光度計(jì)進(jìn)入自檢狀態(tài)，分別檢測(cè)微機(jī)系統(tǒng)、濾光片驅(qū)動(dòng)馬達(dá)定位、鎢燈電壓和氘燈電流、燈源初始位，自檢氘燈能量及鎢燈能量，并自動(dòng)校準(zhǔn)波長(zhǎng)（以氘燈譜線656.1nm為基準(zhǔn)）。

按[↑][↓]鍵選擇所需功能項(xiàng)，選中項(xiàng)將反顯，按[ENTER]鍵進(jìn)入子菜單功能塊。

按UV1901PC紫外分光光度計(jì)[GOTO WL]鍵修改波長(zhǎng)，光標(biāo)自動(dòng)閃爍在波長(zhǎng)輸入處，用數(shù)字鍵輸入您所需測(cè)定的波長(zhǎng)值，確認(rèn)后按[ENTER]鍵加以確定。（本例波長(zhǎng)為500nm）

    屏幕提示：請(qǐng)稍后···

UV1901PC紫外分光光度計(jì)在自動(dòng)將波長(zhǎng)調(diào)整到您所需測(cè)定的波長(zhǎng)值。如輸入數(shù)值有錯(cuò)，請(qǐng)按[CE]鍵清除后重新輸入。如波長(zhǎng)選擇不在可選擇范圍內(nèi)（190 nm～1100nm）。

屏幕提示：輸入錯(cuò)誤 

此時(shí)輸入正確波長(zhǎng)即可。

屏幕中zui下方的四個(gè)功能，分別由儀器鍵盤上的四個(gè)功能鍵來實(shí)現(xiàn)。

F1：為您提供測(cè)試數(shù)據(jù)類型選擇：T（透射比）

F2：為您提供測(cè)試數(shù)據(jù)類型選擇：Abs（吸光度）

F3：為您提供測(cè)試數(shù)據(jù)類型選擇：Conc（濃度）

F4：對(duì)所測(cè)得數(shù)據(jù)進(jìn)行打印輸出

當(dāng)您把所需參數(shù)輸入結(jié)束后，用一對(duì)配套石英比色皿倒入?yún)⒈葮悠罚ū纠齾⒈葮悠窞榭諝猓?。分別放入?yún)⒈裙饴泛蜆悠饭饴?。然后按?/span>[ZERO]鍵。

    屏幕提示：Blanking  100%

儀器在自動(dòng)調(diào)整0%（暗電流）及100%（滿度）。自調(diào)結(jié)束屏幕提示消失后，取出樣品光路中的比色皿，重新倒入待測(cè)樣品并放回樣品光路樣品池，蓋好樣品盒蓋，此時(shí)就可得到您所需數(shù)據(jù)。